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紫外可见分光光度计测定方法
1.对照品比较法
按各品种项【xiàng】下的方法【fǎ】,分【fèn】别配制【zhì】供【gòng】试品溶液和【hé】对照品溶液,对照【zhào】品溶液中所含被测成分的量应为供试【shì】品溶【róng】液中被【bèi】测成分规【guī】定量的100%土10% ,所【suǒ】用溶剂也【yě】应*一致,在规定的【de】波长测定供试品溶液和对照【zhào】品溶液的【de】吸光度【dù】后,按下式计算供试品中被测【cè】溶液的浓度
C = (AX/AR)CR
式中CX为供试品溶液的浓度;AX为供试品溶液的吸收度;
AR为对照品溶液的浓度;CR为对照品溶液的吸收度。
2.吸收系数法
按【àn】各品种项下的方法配制供试品溶液,在规定【dìng】的波长处测定其吸【xī】光【guāng】度,再【zài】以该品种在【zài】规定条【tiáo】件【jiàn】下的吸收系数计算【suàn】含量。用本【běn】法【fǎ】测定时,吸【xī】收系数【shù】通常应大于100,并注意【yì】仪器的校正和检定。
3.比色法
供试品【pǐn】溶【róng】液【yè】加入适量显色剂后测定吸光度以测定其【qí】含量的方法【fǎ】为【wéi】比【bǐ】色法【fǎ】。用比色【sè】法测定时,应取数【shù】份梯【tī】度量的对照品溶液【yè】,用溶剂【jì】补充至同一体积,显色后,以相应试剂为空【kōng】白,在各品种【zhǒng】规定的波长处测定各【gè】份溶【róng】液的吸光度,以【yǐ】吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标【biāo】准曲线【xiàn】,再根据供试【shì】品的【de】吸光【guāng】度在标准【zhǔn】曲【qǔ】线上查得其相应的浓【nóng】度【dù】,并求出其含量。也可取对照品溶液【yè】与供试品溶【róng】液同时操作【zuò】,显色后,以相【xiàng】应【yīng】的试剂为【wéi】空白,在各品种规定的【de】波长处测定【dìng】对照品和供试品溶液的吸光度。按上述【shù】方法计算供试【shì】品溶【róng】液【yè】的浓度。